elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)OD值是optical density(光密度)的縮寫,表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度,是檢測(cè)方法里的專有名詞,檢測(cè)單位用OD值表示,1OD=1og(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。 光通過被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)zui后步驟中OD值的范圍也是有一定講究的,不容小覷。說到OD值范圍,我司業(yè)務(wù)員在售后問題的處理過程中也常會(huì)有客戶咨詢其范圍是多少。其實(shí)是不一定的,我們以AβELISA為例,2以上就會(huì)偏飽和,變化不容易做出來,所以一般把model組控制在0.8-1.5,而control組的話基本跟空白差不多,不到0.1。
所以,一般情況下我們會(huì)建議先做個(gè)標(biāo)曲以及樣品的梯度稀釋,然后選擇在標(biāo)曲中間位置的樣品稀釋度作為以后的參照稀釋度。
同時(shí),也與使用的detector有關(guān),detector有自己的檢測(cè)范圍和線性范圍。如果實(shí)驗(yàn)室使用的儀器,說明書上說檢測(cè)范圍是0~4,線性范圍是0~3,但我們自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的線性范圍是0~2OD。如果只檢測(cè)空白的沒有經(jīng)過處理的Elisa孔,大致在0左右。
HIV抗體ELISA法測(cè)定中空白OD值大于陰性對(duì)照OD值是什么原因,單波長(zhǎng)下和雙波長(zhǎng)下測(cè)定無明顯改變空白做的是試劑空白,不加酶,只加顯色劑和終止液,陰性對(duì)照是試劑盒提供的不用稀釋。450nm下測(cè)定和450/630nm下測(cè)定空白,沒明顯差別。