緩沖液 | 使用液 | 濃貯存液(每升) |
Tris-乙酸(TAE) | 1×:0.04mol/L Tris-乙酸 | 50×:242g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 57.1ml冰乙酸 |
|
| 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-磷酸(TPE) | 1×:0.09mol/L Tris-磷酸 | 10×:10g Tris堿 |
| 0.002mol/L EDTA | 15.5ml85%磷酸(1.679g/ml) |
|
| 40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-硼酸(TBE)a | 0.5×0.045mol/L Tris-硼酸 | 5×:54g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 27.5硼酸 |
|
| 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
堿性緩沖液b | 1×:50mmol/L NaOH | 1×:5ml 10mol/L NaOH |
| 1mmol/L EDTA | 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-甘氨酸c | 1×:25mmol/L Tris | 5×:15.1g Tris |
| 250mmol/L 甘氨酸 | 94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3) |
| 0.1% SDS | 50ml 10% SDS(電泳級) |
緩沖液 | 使用液 | 濃貯存液(每升) |
Tris-乙酸(TAE) | 1×:0.04mol/L Tris-乙酸 | 50×:242g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 57.1ml冰乙酸 |
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| 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-磷酸(TPE) | 1×:0.09mol/L Tris-磷酸 | 10×:10g Tris堿 |
| 0.002mol/L EDTA | 15.5ml85%磷酸(1.679g/ml) |
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| 40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-硼酸(TBE)a | 0.5×0.045mol/L Tris-硼酸 | 5×:54g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 27.5硼酸 |
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| 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
堿性緩沖液b | 1×:50mmol/L NaOH | 1×:5ml 10mol/L NaOH |
| 1mmol/L EDTA | 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-甘氨酸c | 1×:25mmol/L Tris | 5×:15.1g Tris |
| 250mmol/L 甘氨酸 | 94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3) |
| 0.1% SDS | 50ml 10% SDS(電泳級) |
緩沖液 | 使用液 | 濃貯存液(每升) |
Tris-乙酸(TAE) | 1×:0.04mol/L Tris-乙酸 | 50×:242g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 57.1ml冰乙酸 |
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| 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-磷酸(TPE) | 1×:0.09mol/L Tris-磷酸 | 10×:10g Tris堿 |
| 0.002mol/L EDTA | 15.5ml85%磷酸(1.679g/ml) |
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| 40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-硼酸(TBE)a | 0.5×0.045mol/L Tris-硼酸 | 5×:54g Tris堿 |
| 0.001mol/L EDTA | 27.5硼酸 |
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| 20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) |
堿性緩沖液b | 1×:50mmol/L NaOH | 1×:5ml 10mol/L NaOH |
| 1mmol/L EDTA | 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) |
Tris-甘氨酸c | 1×:25mmol/L Tris | 5×:15.1g Tris |
| 250mmol/L 甘氨酸 | 94g 苷氨酸(電泳級)(pH8.3) |
| 0.1% SDS | 50ml 10% SDS(電泳級) |
實驗動物的處死方法很多,應(yīng)根據(jù)動物實驗?zāi)康?、實驗動物品種(品系)、以及需要采集標本的部位等因素,選擇不同的處死方法。無論采用哪一種方法,都應(yīng)遵循安樂死的原則。
安樂死是指在不影響動物實驗結(jié)果的前提下,使實驗動物短時間無痛苦地死亡。
處死實驗動物時應(yīng)注意,首先要保證實驗人員的安全;其次要確認實驗動物已經(jīng)死亡,通過對呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察,對死亡作出綜合判斷;再者要注意環(huán)保,避免污染環(huán)境,還要妥善處理好尸體。
一、頸椎脫臼處死法
此法是將實驗動物的頸椎脫臼,斷離脊髓致死,為大、小鼠zui常用的處死方法。操作時實驗人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上,用左手拇指、食指用力向下按壓鼠頭及頸部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成頸椎脫臼,脊髓與腦干斷離,實驗動物立即死亡。
二、斷頭處死法
此法適用于鼠類等較小的實驗動物。操作時,實驗人員用左手按住實驗動物的背部,拇指夾住實驗動物右腋窩,食指和中指夾住左前肢,右手用剪刀在鼠頸部垂直將鼠頭剪斷,使實驗動物因腦脊髓斷離且大量出血死亡。
三、擊打頭蓋骨處死法
主要用于豚鼠和兔的處死。操作時抓住實驗動物尾部并提起,用木錘等硬物猛烈打擊實驗動物頭部,使大腦中樞遭到破壞,實驗動物痙攣并死亡。
四、放血處死法
此法適用于各種實驗動物。具體做法是將實驗動物的股動脈、頸動脈、腹主動脈剪斷或剪破、刺穿實驗動物的心臟放血,導(dǎo)致急性大出血、休克、死亡。
犬、猴等大動物應(yīng)在輕度麻醉狀態(tài)下,在股三角做橫切口,將股動脈、股靜脈全部暴露并切斷,讓血液流出。操作時用自來水不斷沖洗切口及血液,既可保持血液暢流無阻,又可保持操作臺清潔,使實驗動物急性大出血死亡。
五、空氣栓塞處死法
處死兔、貓、犬常用此法。向?qū)嶒瀯游镬o脈內(nèi)注入一定量的空氣,形成肺動脈或冠狀動脈空氣栓塞,或?qū)е滦那粌?nèi)充滿氣泡,心臟收縮時氣泡變小,心臟舒張時氣泡變大,從而影響回心血液量和心輸出量,引起循環(huán)障礙、休克、死亡??諝馑ㄈ幩婪ㄗ⑷氲目諝饬浚埡屯脼?0~50ml,犬為90~160ml。
六、過量麻醉處死法
此法多用于處死豚鼠和家兔??焖龠^量注射非揮發(fā)性麻醉藥(投藥量為深麻醉時的30倍),或讓動物吸入過量的乙醚,使實驗動物中樞神經(jīng)經(jīng)過過度抑制,導(dǎo)致死亡。
七、毒氣處死法
讓實驗動物吸入大量CO2等氣體而中毒死亡。