Elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)遇到各種不同的情況,不過導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)出問題總是有原因的。有時(shí)候ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)會(huì)出現(xiàn)吸光值變高的情況,這就讓很多人不解了。下面為大家具體介紹一下為什么elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)吸光值會(huì)偏高。
一、室溫太高(大于25℃)。
解決辦法:若無法降低室內(nèi)溫度,請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間。
二、底物溶液受到污染。
解決辦法:若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請(qǐng)不要再使用。
三、原因:反應(yīng)時(shí)間超過太久。
解決辦法:請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間。
四、原因:酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法:使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。
ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。