Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
 

　　Elisa試劑盒的使用小貼士：
 

　　一、溫度
 

　　1.試劑盒回溫
 

　　大多數(shù)ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后，先不要急于打開試劑盒，要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。
 

　　Tips：提前1~2小時取出試劑盒，放在室溫中；或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。
 

　　2.環(huán)境溫度的控制
 

　　實驗室可采用以下措施控制溫度：
 

　　1)實驗室應(yīng)配備溫濕度表，且確保定期計量。
 

　　2)根據(jù)天氣情況設(shè)定實驗室空調(diào)制冷或加溫功能，待室溫穩(wěn)定且無干擾的條件下再開始檢測流程。
 

　　3)選用帶溫控裝置的孵育儀器，如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標儀等。注意要提前開啟預(yù)熱。
 

　　Tips：大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時間較短，環(huán)境溫度對檢測結(jié)果會有很大影響，所以控制好環(huán)境溫度是保證試劑盒檢測結(jié)果有效的重要因素。
 

　　3.孵育
 

　　孵育時要保證溫度均勻，防止揮發(fā)變干。孵育時使用封板膜，并置于暗處孵育。多塊板一起實驗時，要平放各板，不要疊放，避免溫度擴散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。
 

　　二、剩余試劑的妥善保存
 

　　試劑盒恢復至室溫后，取出要使用的酶標板孔，未使用的酶標板孔應(yīng)及時放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，2℃-8℃冷藏保存。
 

　　Tips：切忌將未*平衡至室溫的酶標板放回鋁箔袋，因為此時由于溫度差，酶標板上會有水汽，不利于穩(wěn)定保存。
 

　　三、加樣
 

　　1.加樣要快速準確，時間宜控制在15分鐘內(nèi)。
 

　　2.如樣品量較大，可分次完成實驗，或?qū)y樣液置于預(yù)混微孔板中使用多通道移液器快速移取。
 

　　3.吸取同一試劑，可將試劑倒入V型加樣槽中，使用多通道移液器快速移取。
 

　　Tips：在加樣槽上套上一次性PE手套，再倒入檢測用試劑，可以保證試劑完整性且不被污染。加樣槽更換一次性手套后可繼續(xù)下一種試劑的使用。