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Elisa試劑盒實驗包被的條件該如何選擇?點擊次數(shù):1158 更新時間:2022-05-13

  Elisa試劑盒具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領(lǐng)域的應用范圍日益擴大。
 
  Elisa試劑盒實驗包被的條件選擇:
 
  1、包被抗原的選擇
 
  包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被,對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被(先用能夠與目的抗原反應的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標板上,再通過特異性反應使抗原固相化)。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標板上,一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。
 
  2、包被液的選擇
 
  一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
 
  3、包被溫度的選擇
 
  通常是4-8度條件下過一夜或者37度保溫2小時,我們強烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。
 
  4、包被濃度的選擇
 
  包被的較適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明確針對特定包被抗原的較適包被濃度需要通過實驗來確定。
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