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細(xì)胞因子常用的標(biāo)本類型有哪些?點(diǎn)擊次數(shù):985 更新時間:2021-10-25

  細(xì)胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑(如A、HAS或蔗糖等),并且通常以較少量的鹽來進(jìn)行凍干處理,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后,務(wù)必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁。細(xì)胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑(如A、HAS或蔗糖等),并且通常以較少量的鹽來進(jìn)行凍干處理,因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后,務(wù)必在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象)。
 
  細(xì)胞因子常用的標(biāo)本類型:
 
  全血:使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血,不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑,血樣在8小時內(nèi)分析,超過8小時會導(dǎo)致活性的損失,一般細(xì)胞因子陽性細(xì)胞會減少5%。如不能在8小時之內(nèi)檢測,應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。
 
  自身血漿中外周血單個核細(xì)胞(PBMCs):使用肝素鈉抗凝的采血后,分離PBMCs,24小時內(nèi)分析。
 
  組織培養(yǎng)基中的外周血單個核細(xì)胞(PBMCs):用Ficoll分離PBMCs,將細(xì)胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中,調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為2×106細(xì)胞/ml。
 
  調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度2×106細(xì)胞/mL于新鮮培養(yǎng)基中。
 
  冰凍全血與PBMCs:使用1×紅細(xì)胞裂解液處理活化的外周血或者PBMCs,用PBS漂洗,并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重懸,-70℃凍存。溶化后細(xì)胞置于染色管中,加上2~3mL的洗液,離心5分鐘后,用破膜劑對細(xì)胞進(jìn)行破膜和染色。
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