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蛋白提取操作時應(yīng)注意的細(xì)節(jié)點擊次數(shù):1989 更新時間:2020-07-09

                                           蛋白提取操作時應(yīng)注意的細(xì)節(jié)

總體規(guī)則:蛋白酶普遍存在,在提取蛋白質(zhì)的步驟中,早些抑制,經(jīng)常抑制

分裝蛋白溶液,儲存于不同的溫度和不同的緩沖液中,測蛋白活性,找出適宜儲存條件。

冷藏,并加入穩(wěn)定劑。這些穩(wěn)定劑一般都能充分保持蛋白的生物學(xué)活性。

將蛋白溶液儲于50%(V/V)的甘油或懸于硫酸銨(3.2M)中,避免凍存

冰結(jié)晶會造成物理剪切及蛋白變性。

避免酶的反復(fù)凍融,如果酶需要凍存,分裝成小管后凍存。

蛋白質(zhì)的儲存:

蛋白樣品在液氮中速凍,拿出后加入10-20%的甘油,長期儲存

整個實驗過程中,都要將蛋白樣品置于冰上

從母管中吸取不同的蛋白時,都要用新鮮的槍頭

不要將未用的溶液倒回母管

戴手套操作,避免蛋白交叉污染,或是蛋白酶的污染

避免劇烈的震蕩,避免溶液中混入蛋白變性劑

實驗的過程中應(yīng)避免灰塵進入,灰塵包含60%的肌氨酸

操作過程中:

操作時總是小體積小量的操作,避免污染,并且動作要快
 

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