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流式抗體的知識要點,一看便知!點擊次數(shù):2527 更新時間:2020-04-28

      流式抗體能夠在短時間內(nèi)檢測分析或分選大量細胞,在血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、藥物學(xué)等領(lǐng)域中的應(yīng)用越來越廣泛。其純度、批次穩(wěn)定性、特異性,以及流式結(jié)果的可重復(fù)性備受重視。
  流式抗體的基本結(jié)構(gòu):
  一個抗體分子上的兩個抗原結(jié)合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段(crystalline fragment,Fc),糖結(jié)合在FC 上。Fab是抗原結(jié)合片段,直接結(jié)合抗原。直接效應(yīng)。Fc是結(jié)晶片段,間接效應(yīng)端。
  抗體與細胞的結(jié)合過程中一般會出現(xiàn)以下情況:
  在抗體孵育過程中,只有抗體的Fab端與目標抗原結(jié)合(特異性結(jié)合)時,這樣的流式圖才能反應(yīng)出細胞抗原表達的真實情況。
  但是,在分子間各種作用力的推動下,抗體FC端也經(jīng)常與細胞表面的FC受體結(jié)合,即我們常說的非特異性結(jié)合,此時流式結(jié)果就往往不能反映真正的抗原表達情況。
  那么,我們在實驗中如何避免這種非特異性情況的出現(xiàn)呢?
  FC受體封閉:
  加入FC受體封閉劑,對細胞膜表面的FC受體提前進行人工封閉干預(yù);或做CD16/CD32抗體封閉實驗;
  同型對照(Isotype)抗體;
  重組基因工程改造抗體(REAfinity? Recombinant Antibodies)。
電話:
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